이용해서 PCR을 한 경우 원하는 서열 양끝쪽에 overhang으로 추가로 A 서열이 만들어진다. A와 T는 서로 상보적인 결합을 하므로 PCR 결과물의 A서열과 T-vector의 T서열은 서로 상보적인 결합을 하게 된다.
1. plasmid DNA isolation
- plasmid를 GFP를 운반하기 위한 Vector로 사용하기 위해 plasmid DNA를 isolation하여 한
이용한 실험은 Cell line이나 초파리, Zebrafish 수준에서는 Gene targeting을 하는 데에는 높은 효율을 보여주었다. 한 연구에서는 사람에게서 severe combined immune deficiency (SCID)을 일으키는 IL2Rg gene의 결함을 cell line 수준에서 높은 효율로 정상 세포로 복구한다는 결과도 있었다. 또한 ZFN기술을 포유동물에 응용하
5. 실험배경 이론 및 참고사항
* Transformation 과 Transfection의 차이
Transfection은 진핵생물체에 virus vector를 사용하는 것을 말하며, non-viral vector를 사용할 때에는 포유류에 한하여 용어를 사용한다. Transformation이라는 용어는 non-viral vector를 이용하여 bacteria의 형질전환을 시키거나, 비동물성 진핵체 즉, fu
삽입되어 transgenic animal을 형성한다. 이러한 원리를 이용하여 4-8 세포기의 수정란을 회수하여 투명대를 제거한 후 virus를 생산하는 세포와 함께 16-24시간 배양한 후 foster(대리모)에 이식하여 외래 유전자를 가진 동물을 만들어 내는 방법이다.
1) retrovirus DNA integration의 특징
- 높은 효율성을 가진
Escherichia coli는 유전학적 연구가 가장 많이 되어 있는 세균으로서, 조작이 쉬운 장점이 있기 때문에 재조합 DNA을 만들고, 재조합 단백질을 생산하는데 많이 쓰이고 있다. 토양 등 환경의 DNA (metagenome)을 이용하여 유용한 물질을 얻는 목적의 metagenome library를 구축하는 경우에도 유용한 host로 쓰이지만 여
이용, 기존의 번식방법으로는 나타날 수 없는 형질이나 유전자를 지니도록 개발된 농산물로 정의된다. GMO를 만드는 방법으로 병에 약하나 맛은 있다. 병에 견디는 유전자 넣으면, 병에 견디고 맛있는 신품종 전통적 개량기술에 비해 짧은 시간에 우수한 형질을 얻을 수 있다.
유용한 유전자를 선발하여
3. 연구동향 - 유전자 삽입을 통한 GFP의 이용
현재 이 부분은 활발히 연구되고 있는 방향 중 하나여서, 연구 동향에 대해서 이야기한 후에 우리가 생각한 응용방향에 대해서 나가는 것이 더 좋을 것 같다. 현재의 연구는 GFP를 유전자에 삽입한 후, 형광색이 나기 때문에, 이것을 통하여 세포를 더 용이
.
Gel Purification
1. UV로 확인한 Agarose gel의 DNA band를 잘라서 각각 1.5ml microcentrifuge tube에 넣어 무게를 잰다(pET-14b, FabG).
2. 빈 tube의 무게와 1.에서 잰 무게의 차를 이용하여 gel의 무게를 정한다.
3. Gel의 3배 만큼의 Gel binding Buffer를 첨가한다.(gel을 녹인다)
4. 60℃에서 10분간 incubation하고 2~3분마다 vortex
실험의 혁명적 연구기술의 등장은 의학과 생물학을 크게 변모시키고 있다. 동식물세포의 특정유전자의cloning(균일한 DNA분자의 집단을 대량으로 얻는 것), 구조해석, 정보발현 등의 연구를 통해서 기초적 학문분야에서는 발생, 분화, 면역, 발암 등의 기구(mechanism)가 유전자 수준에서 해명되고 있고, 산업
실험동물을 생산하여 인류의 질병퇴치를 위한 모델동물로 사용할 수 있다. 새롭게 형질전환된 품종이나 계통을 만듦으로써 가축육종을 효과적으로 할 수 있다.
의학과 산업이외에 복제기술을 이용해 전세계의 멸종위기 동물을 모두 구원하자는 야심찬 계획도 있다. 야생종이 멸종했을 때 복제기술을